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聚丙烯酰胺廠家?guī)懔私馄淠z知識

  • 時間:2020-05-08 19:21:03
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        聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成凝膠,是以丙烯酰胺為單位, 由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的,經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀,控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號的凝膠。交聯(lián)劑越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠-P (Bio-Gel P),由日本tosoh的TSKGEL的pw系列,適合蛋白和多糖的純化。即丙烯酰胺和少量交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺,在催化劑TEMED和氧化劑過硫酸銨作用下聚合形成凝膠。
        聚丙烯酰胺凝膠指的是由丙烯酰胺單體,以次甲基雙丙烯酰胺為交聯(lián)劑,經(jīng)四甲基乙二胺催化、通過游離基引發(fā)(光引發(fā)、化學(xué)引發(fā)等) 聚合而成的交聯(lián)聚丙烯酰胺。它是一種化學(xué)合成的人工凝膠,其商品名為生物凝膠P (Bio-Gel P)。它不同規(guī)格的生物凝膠用數(shù)字和符號表明,如Bio-Gel P-4 等,數(shù)字表示凝膠排阻極限的1/1000,即排阻極限是4000 Da。
        變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)是根據(jù)寡核苷酸的大小來分離,因此可將全長產(chǎn)物與不完整的短分子分開。電泳時通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸,電泳后在紫外燈下定位寡核苷酸條帶,將長度正確的寡核苷酸從凝膠上切下。原理:蛋白質(zhì)或多肽與SDS結(jié)合,經(jīng)熱變性和二硫鍵的還原,形成所帶負電荷相對一致的非折疊衍生物,其泳動速度主要由分子量決定。
        非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質(zhì)進行聚丙烯酰胺凝膠電泳,常用于酶的鑒定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據(jù)其電泳遷移率的不同和凝膠的分子篩作用,因而可以得到較高的分辨率,尤其是在電泳分離后仍能保持蛋白質(zhì)和酶等生物大分子的生物活性,對于生物大分子的鑒定有重要意義,其方法是在凝膠上進行兩份相同樣品的電泳,電泳后將凝膠切成兩半,一半用于活性染色,對某個特定的生物大分子進行鑒定,另一半用于所有樣品的染色,以分析樣品中各種生物大分子的種類和含量。